HPLC和LC/MS 緩沖液選擇指南:僅關(guān)注高pH值?
如前所述,如果流動相pH值增加至8以上,硅膠的溶解度也會隨之增加,所以通常不推薦pH>8。
然而,為了獲得所需的分離,可能需要使用更高pH的流動相。
在這種情況下,您應(yīng)該選擇專門用于高pH值的色譜柱。
通常,高純度硅膠、高“碳載量”和封端會降低硅膠的溶解度。
由于在高pH值下,磷酸鹽緩沖液會增加硅膠溶解度,因此應(yīng)避免使用。
在這種情況下,應(yīng)使用有機(jī)緩沖液(如吡咯烷),它可以在高pH值下,幫助延長色譜柱的使用壽命。
即便對使用條件進(jìn)行了篩選,在pH>8的情況下,色譜柱的使用壽命也會縮短。
不過,使用聚合物而非硅膠顆粒的色譜柱不易受到硅膠溶解度的影響,因此其可以在高pH值的情況下使用;但這類色譜柱無法具有硅基色譜柱那樣較寬范圍的固定相。