UPLC(Ultra Performance Liquid Chromatography)是一種高效液相色譜技術(shù),具有高分辨率、高效率和高靈敏度等優(yōu)點(diǎn)。在UPLC中,色譜柱的選擇是非常關(guān)鍵的,不同類型的色譜柱可以用于不同的化合物分離。
根據(jù)不同的分離機(jī)理,現(xiàn)有的UPLC色譜柱可以分為以下幾類:
1. 反相色譜柱(RP色譜柱):反相色譜柱使用非極性的固定相作為分離介質(zhì),可以分離極性化合物,如蛋白質(zhì)、藥物等。常用的固定相材料有C18、C8、C4等。
2. 層析緩沖劑離子交換色譜柱(SCX色譜柱):離子交換色譜柱是一種利用與樣品離子間的電荷交換來(lái)分離化合物的柱子,可以用于離子、蛋白質(zhì)、核酸等的分離。SCX色譜柱是常見的離子交換柱之一,通常使用高濃度的鹽水或緩沖溶液作為洗脫緩沖劑。
3. 氫氟酸過渡金屬柱(HILIC色譜柱):HILIC(Hydrophilic Interaction Chromatography)色譜柱主要用于分離極性和親水性化合物,如糖類、多肽等。在HILIC柱上,利用極性固定相材料和極性流動(dòng)相的互作用,實(shí)現(xiàn)樣品的分離。
4. 手性色譜柱(CSP色譜柱):CSP(Chiral Separation Chromatography)色譜柱用于分離手性化合物,如藥物、氨基酸等。其中,固定相是手性選擇性較強(qiáng)的化合物,如糖類衍生物、環(huán)糊精等。
在選擇UPLC色譜柱時(shí),需要考慮樣品性質(zhì)、分離機(jī)理、分離效率、分離時(shí)間等多個(gè)因素。具體選擇時(shí)可以根據(jù)分析任務(wù)的不同,選擇合適的色譜柱進(jìn)行分離。