血清中布洛芬藥物檢測的快速萃取方法
(SuperClean SLE)
一、實驗目的
應用SuperClean SLE液-液萃取柱快速提取人體血清中的布洛芬藥物。
二、實驗目標物
布洛芬(CAS:15687-27-1)
三、實驗材料
NuAnalytical SuperClean SLE液-液萃取柱1 mL。
四、實驗方法
1、 樣品預處理
將血清樣品用1%的甲酸(1:1,v/v)稀釋并混勻,使樣品最終的pH在3.2左右。取一部分空白血清備用;剩下的空白血清加入一定體積的布洛芬儲備液,配制成濃度為10 mg/L的布洛芬加標血清。
2、上樣
向SLE柱中加入1 mL預處理的樣品,加負壓或正壓啟動流速(5-15秒),然后讓樣品吸附于填料中約5分鐘。
3、 洗脫
向柱中加入4 mL甲基叔丁基醚。使溶劑通過重力流出并收集洗脫液,然后再向柱中加入4 mL的甲基叔丁基醚,收集洗脫液。在收集結束后加適當?shù)恼龎夯蜇搲?-15" Hg)2分鐘并收集最終洗脫出的溶劑。
4、濃縮
將上述收集的提取液于35℃左右的溫度低真空下濃縮,再用緩氮氣流去除乙醚溶液, 使其濃縮至近干。取1 mL(60:40,v/v)的水/甲醇定容,過0.22 μm濾膜,供HPLC測定。
5、HPLC條件
色譜柱:SuperLu C18 (250×4.6mm,5μm)
檢測器:UV@220 nm
流動相:A: 乙腈 B:0.1%甲酸水溶液
柱溫:室溫
流速:1.0mL/min
進樣量:20μL
洗脫方式:等度洗脫,A:B=50:50
五、實驗結果
1、血清中的布洛芬的回收結果
表1 血清中的布洛芬的回收結果
名稱 |
保留時間/min |
平均回收率/% |
布洛芬 |
5.34 |
78.22 |