n 固定相規(guī)格
n 依據(jù)相對(duì)疏水性進(jìn)行相比較
n 中性化合物的柱效比較
n 依據(jù)金屬活性進(jìn)行相比較
n 依據(jù)硅醇活性進(jìn)行相分組
n 堿性化合物的柱效比較
n 依據(jù)硅醇活性和惰性進(jìn)行相分類
引言
有多種不同的 C18 色譜柱可供選擇,但為特定分離找到合適的色譜柱可能非常耗時(shí)且價(jià)格昂貴。
兩種明顯相似的 C18 相可以產(chǎn)生極為不同的結(jié)果。
例如,圖 1 比較了在相同流動(dòng)相條件下相同樣品混合物在Hypersil HyPURITY C18 和Symmetry C18 色譜柱上的分離結(jié)果。
即使 2 種色譜柱均裝有“新一代”C18 固定相,峰之間的帶間距(選擇性)仍極為不同。
圖 1
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Symmetry C18 和 Hypersil HyPURITY C18 都是新一代固定相。你將期望他們提供相似的性能, 在某些情況下確實(shí)如此。然而,在這里給出的例子中,您可以看到峰保留時(shí)間、選擇性、甚至峰形的差異。
沒有更多的信息,不可能預(yù)測(cè)將如
何比較不同固定相的性能。
C18 反相 HPLC 色譜柱的比較指南提供了常用 C18 色譜柱的基本比較信息,以幫助您在投入時(shí)間和金錢進(jìn)行色譜測(cè)試之前更輕松地識(shí)別相似點(diǎn)和差異。
希望這些信息可以幫助您更快地找到合適的色譜柱。
本指南中僅評(píng)估了硅膠基質(zhì) C18鍵合相。
不包括其他鍵合相,如C8、CN、苯基和極性嵌入相。
本指南不會(huì)標(biāo)識(shí)整體“最佳”色譜柱。最適合某一應(yīng)用的色譜柱不一定在其他應(yīng)用中也最有效。
而且,肯定沒有一個(gè)單一色譜柱最適合所有應(yīng)用。
但是,本指南可幫助您識(shí)別性能良好的色譜柱,使您至少可以縮小色譜測(cè)定中的色譜柱數(shù)量。
您可能會(huì)發(fā)現(xiàn)本指南有助于您識(shí)別可以提供良好分離和性能的多個(gè)色譜柱。一直以來,人們總是希望為某一應(yīng)用確定一種以上色譜柱,特別是當(dāng)您正在進(jìn)行常規(guī)分析時(shí)。
越來越多的色譜學(xué)家正尋求識(shí)別適合于其分析的替代品牌的HPLC 色譜柱。
為某一方法選擇替代色譜柱可以降低由于色譜柱問題(如從一個(gè)生產(chǎn)批次到另一個(gè)生產(chǎn)批次的選擇性變化或供應(yīng)商交貨遲緩)而導(dǎo)致“停工時(shí)間”的風(fēng)險(xiǎn)。當(dāng)替代某一方法時(shí),尋找一種替代或備用色譜柱(將提供可接受選擇性和性能)可能與尋找用于開發(fā)初始分離方法的正確色譜柱的花費(fèi)和耗時(shí)一樣。
我們希望本指南通過識(shí)別具有相似色譜特征的色譜柱,來使此工作更加容易。
固定相規(guī)格
固定相規(guī)格提供了有助于確定選擇哪些相進(jìn)行評(píng)估的基本信息。
例如,具有高表面積和高碳載量的相對(duì)疏水性化合物的保留通常要長(zhǎng)于具有低表面積和低碳載量的相。
如果您正在分析大分子(如肽類和蛋白質(zhì)),則大孔徑(200-300?)相通常比小孔徑相更能提供良好的性能。
新型高純度硅膠通常比較老的、更具酸性的硅膠更能為堿性化合物提供良好的峰形(參見圖2)。
然而,固定相規(guī)格不會(huì)給您提供足夠的信息來準(zhǔn)確預(yù)測(cè)保留值或帶間距(選擇性)。
當(dāng)分離極性化合物時(shí)尤其如此。
圖 2
高純度硅膠為堿性化合物提供更佳的峰形
陽離子化合物和硅膠固定相載體表面上的酸 性硅醇位點(diǎn)之間的相互作用可以造成滯留和 峰拖尾。
通??梢灶A(yù)期用高純度硅膠(較少酸 性硅膠)制備的相可以為堿性化合物提供更佳 的峰形。