植物油中苯并(a)芘檢測的固相萃取方法（Speciclean苯并芘檢測專用小柱）

一、實驗目的

本研究利用固相萃取法作為植物油的前處理方法，HPLC法作為分析方法，檢測其中苯并(a)芘的含量。該方法可簡化樣品的前處理過程，節(jié)省有機溶劑的使用，操作簡便。

二、實驗目標物

苯并(a)芘(CAS:50-32-8)。

三、應用范圍

本方法適用于植物油中苯并(a)芘的檢測的HPLC檢測及確證。

四、參考標準

《GB/T 22509-2008動植物油脂苯并(a)芘的測定 反相高效液相色譜法》。

五、實驗材料

廣州菲羅門----苯并芘檢測專用小柱22g/60mL(貨號：9B-S002-6022000，描述：Speciclean BAP)。

六、實驗步驟

1、樣品提取

準確稱取植物油樣品0.4 g于15 mL離心管中加入5 mL 正己烷，渦旋1 min。待凈化。

2、SPE柱凈化

(1) 活化：苯并芘檢測柱使用前用30 mL正己烷活化 。
(2) 上樣和洗脫：在苯并芘檢測柱上加入待凈化樣品，收集流出液，然后用40 mL正己烷-二氯甲烷溶液（3:1，v/v）洗脫，收集流出液，合并流出液。（在上樣洗脫的過程中，要注意柱體不能干涸。)
(3) 重新溶解：流出液50 ℃減壓蒸餾至近干，加1 mL甲基叔丁基醚定容，過0.45 μm濾膜，待上機測試。

3、HPLC條件

設   備：Waters Alliance 2695
色譜柱 ：Neptune C18 5μ 250*4.6mm(貨號：FMG-5361-EONU)
檢測器 ：Waters 2475熒光檢測器
流動相：A：乙腈  B：水
洗脫方式：等度洗脫 A:B=88:12
流速：1 mL/min
發(fā)射波長：406 nm
激發(fā)波長：384 nm
進樣體積:  10 μL

七、實驗結果

1、0.05 mg/kg植物油中苯并(a)芘添加回收結果
表1  0.05 mg/kg植物油中的苯并(a)芘添加回收結果

 

2、添加水平為0.05 mg/kg植物油中苯并(a)芘檢測的液相色譜圖

圖1  添加水平為0.05 mg/kg植物油中苯并(a)芘檢測的液相色譜圖